产品分类
cd81 Knockout Hepa 1-6 Cell Line
- 产品描述
- 细胞复苏
- 细胞传代
- 细胞冻存
- 抗体验证结果
-
- 品牌: ELEMok138cn太阳集团529
- 商品名称: cd81 Knockout Hepa 1-6 Cell Line
- 商品编号: LM02086037706
- Gene Symbol: Cd81, Tapa1
- Ensembl ID: ENSMUSG00000037706
- Uniprot ID: P35762
- 宿主细胞 / 类型: Hepa 1-6/小鼠肝癌细胞
- NCBI Gene ID: 12520
- 规格: 1×10^6 cells/ 冻存管
- 筛选标记: N/A
- 生长特性: 贴壁细胞，上皮细胞样
- 培养条件: 37℃,5% CO2 的培养箱，1/2 到 1/4 传代
- 倍增时间: ~24-36 hours
- 生长培养基: DMEM+10%FBS+1%P,S
- 参考换液频率: 2~3次/周
- 支原体检测结果: 阴性
- 敲除效率（Sanger测序）: 100%
- 蛋白质组验证结果: 已完成蛋白水平验证
- 抗体货号: 添加中
- 目标基因介绍: Structural component of specialized membrane microdomains known as tetraspanin-enriched microdomains (TERMs), which act as platforms for receptor clustering and signaling. Essential for trafficking and compartmentalization of CD19 receptor on the cell surface of activated B cells (PubMed:23499492). Upon initial encounter with a microbial pathogen, enables the assembly of CD19-CR2 and B cell receptor complexes at signaling TERMs, lowering the threshold dose of antigen required to trigger B cell clonal expansion and humoral immune response (By similarity). In T cells, associates with CD4 or CD8 coreceptors and defines the maturation state of antigen-induced synapses with B cells (By similarity). Facilitates localization of CD3 in these immune synapses, required for costimulation and sustained activation of T cells, preferentially triggering T helper type 2 immune response (PubMed:11046035). Can act both as positive and negative regulator of homotypic or heterotypic cell-cell fusion processes. In myoblasts, associates with another tetraspanin CD9 in complex with PTGFRN and inhibits myotube fusion during muscle regeneration (PubMed:23575678). In macrophages, associates with CD9 and beta-1 and beta-2 integrins, and prevents macrophage fusion into multinucleated giant cells specialized in ingesting complement-opsonized large particles. Also prevents the fusion between mononuclear cell progenitors into osteoclasts in charge of bone resorption. Positively regulates sperm-egg fusion and may be involved in the acrosome reaction (PubMed:16380109, PubMed:17290409). Regulates protein trafficking in intracellular compartments. In T cells, associates with dNTPase SAMHD1 and defines its subcellular location, enabling its degradation by the proteasome and thereby controlling intracellular dNTP levels (By similarity). Also regulates integrin-dependent migration of macrophages, particularly relevant for inflammatory response in the lung (PubMed:18662991).By Similarity6 Publications (Microbial infection) Specifically required for Plasmodium yoelii infectivity of hepatocytes, controlling sporozoite entry in hepatocytes via the parasitophorous vacuole and subsequent parasite differentiation to exoerythrocytic forms.
- 细胞开发路径: 采用CRISPR-RNP方法生成稳定KO Cell line；Sanger 测序结果显示KO Cell line敲除效率100%。
- 应用: 高敲除效率的基因敲除细胞系（KO Cell Line），特别适用于初步功能分析、复杂疾病模型的开发、精准药物筛选以及广泛的基因发现研究。
关键词:- Cd81
- Tapa1
-
01. 在 37℃水浴中预热完全培养基。
02. 将冻存管在 37℃水浴中解冻 1-2 分钟。
03. 将冻存管转移到生物安全柜中，并用 70% 乙醇擦拭表面。
04. 拧开冻存管管盖，将细胞悬液轻轻转移到含有 9mL 完全培养基的无菌离心管中。
05. 在室温下以 125g 离心 5-7 分钟，弃上清。
06. 用 5mL 的完整培养基重悬细胞沉淀，将细胞悬液转移到 T25 培养瓶中。
07. 将细胞转移到 37℃,5% CO2 的培养箱中培养。
08. 参考传代比例：1/2 到 1/4 传代，2-3 天长满。 -
01. 待培养瓶中细胞汇合度至 80%-90% 以上，可进行细胞传代。
02. 将培养基、PBS、胰酶（0.25%Trypsin_EDTA Gibco 25200-056） 等从 4℃冰箱中拿出， 置于 37℃水浴中温度接近 37℃时取出并在瓶子表面喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。03. 从培养箱中取出待传代的培养瓶，瓶身喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
04. 为避免冲散细胞，沿培养瓶上壁 PBS 润洗细胞，清洗细胞后弃去，T25 加 2mL。
05. 加入对应体积的胰酶（T75 加 1.5mL， T25 加 0.5mL） ，并轻轻晃动瓶身使胰酶平铺满细胞 底部。可根据实际情况适当增加或减少用量。约 1-2min 后大部分细胞脱落时，加入对应体积的完全培养基终止消化，并用 5mL 移液管轻轻吹打至细胞全部脱落。
06. 将细胞悬液转移至 15mL 离心管，悬液 300g 离心 5min，弃上清。
07. 移取 5mL 完全培养基重悬细胞，按需求调整接种比例，并补充培养瓶中完全培养基，T75 加至 13-15mL，T25 加至 5mL，加 1% 双抗。
08. 盖上瓶盖拧紧后轻轻晃动瓶身，使细胞混合均匀后置于 37℃,5% CO2 培养箱中。 -
01. 准备冻存液，并提前预冷。
02. 确保待冻存的细胞满足冻存要求，用显微镜检查以下状态：健康的外观及形态特征、所处生 长周期（对数晚期）、无污染或衰退迹象。
03. 对细胞进行消化及离心处理（具体步骤参考传代培养流程）
04. 按照每管 1mL 的量添加冻存液重悬细胞，吹打均匀后分装至冻存管。
05. 将细胞放在程序降温盒中，在 -80℃冰箱中冷冻。
06. 后续将细胞转移到液氮罐中，以便长期储存。 - 抗体验证中
产品类型： 基因敲除细胞系
细胞系信息
Gene Symbol
Cd81, Tapa1
NCBI Gene ID
12520
Ensembl ID
ENSMUSG00000037706
Uniprot ID
P35762
筛选标记
N/A
宿主细胞 / 类型
Hepa 1-6/小鼠肝癌细胞
规格
1×10^6 cells/ 冻存管
生长培养基
DMEM+10%FBS+1%P,S
生长特性
贴壁细胞，上皮细胞样
培养条件
37℃,5% CO2 的培养箱，1/2 到 1/4 传代
倍增时间
~24-36 hours
参考换液频率
2~3次/周
支原体检测结果
阴性
敲除验证
敲除效率（Sanger测序）
100%
蛋白质组验证结果
已完成蛋白水平验证
抗体货号
添加中
抗体验证结果
细胞系说明
目标基因介绍
Structural component of specialized membrane microdomains known as tetraspanin-enriched microdomains (TERMs), which act as platforms for receptor clustering and signaling. Essential for trafficking and compartmentalization of CD19 receptor on the cell surface of activated B cells (PubMed:23499492). Upon initial encounter with a microbial pathogen, enables the assembly of CD19-CR2 and B cell receptor complexes at signaling TERMs, lowering the threshold dose of antigen required to trigger B cell clonal expansion and humoral immune response (By similarity). In T cells, associates with CD4 or CD8 coreceptors and defines the maturation state of antigen-induced synapses with B cells (By similarity). Facilitates localization of CD3 in these immune synapses, required for costimulation and sustained activation of T cells, preferentially triggering T helper type 2 immune response (PubMed:11046035). Can act both as positive and negative regulator of homotypic or heterotypic cell-cell fusion processes. In myoblasts, associates with another tetraspanin CD9 in complex with PTGFRN and inhibits myotube fusion during muscle regeneration (PubMed:23575678). In macrophages, associates with CD9 and beta-1 and beta-2 integrins, and prevents macrophage fusion into multinucleated giant cells specialized in ingesting complement-opsonized large particles. Also prevents the fusion between mononuclear cell progenitors into osteoclasts in charge of bone resorption. Positively regulates sperm-egg fusion and may be involved in the acrosome reaction (PubMed:16380109, PubMed:17290409). Regulates protein trafficking in intracellular compartments. In T cells, associates with dNTPase SAMHD1 and defines its subcellular location, enabling its degradation by the proteasome and thereby controlling intracellular dNTP levels (By similarity). Also regulates integrin-dependent migration of macrophages, particularly relevant for inflammatory response in the lung (PubMed:18662991).By Similarity6 Publications (Microbial infection) Specifically required for Plasmodium yoelii infectivity of hepatocytes, controlling sporozoite entry in hepatocytes via the parasitophorous vacuole and subsequent parasite differentiation to exoerythrocytic forms.
细胞开发路径
采用CRISPR-RNP方法生成稳定KO Cell line；Sanger 测序结果显示KO Cell line敲除效率100%。
应用
高敲除效率的基因敲除细胞系（KO Cell Line），特别适用于初步功能分析、复杂疾病模型的开发、精准药物筛选以及广泛的基因发现研究。
细胞培养说明
细胞复苏
01. 在 37℃水浴中预热完全培养基。
02. 将冻存管在 37℃水浴中解冻 1-2 分钟。
03. 将冻存管转移到生物安全柜中，并用 70% 乙醇擦拭表面。
04. 拧开冻存管管盖，将细胞悬液轻轻转移到含有 9mL 完全培养基的无菌离心管中。
05. 在室温下以 125g 离心 5-7 分钟，弃上清。
06. 用 5mL 的完整培养基重悬细胞沉淀，将细胞悬液转移到 T25 培养瓶中。
07. 将细胞转移到 37℃,5% CO2 的培养箱中培养。
08. 参考传代比例：1/2 到 1/4 传代，2-3 天长满。
细胞传代
01. 待培养瓶中细胞汇合度至 80%-90% 以上，可进行细胞传代。
02. 将培养基、PBS、胰酶（0.25%Trypsin_EDTA Gibco 25200-056） 等从 4℃冰箱中拿出， 置于 37℃水浴中温度接近 37℃时取出并在瓶子表面喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
03. 从培养箱中取出待传代的培养瓶，瓶身喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
04. 为避免冲散细胞，沿培养瓶上壁 PBS 润洗细胞，清洗细胞后弃去，T25 加 2mL。
05. 加入对应体积的胰酶（T75 加 1.5mL， T25 加 0.5mL） ，并轻轻晃动瓶身使胰酶平铺满细胞 底部。可根据实际情况适当增加或减少用量。约 1-2min 后大部分细胞脱落时，加入对应体积的完全培养基终止消化，并用 5mL 移液管轻轻吹打至细胞全部脱落。
06. 将细胞悬液转移至 15mL 离心管，悬液 300g 离心 5min，弃上清。
07. 移取 5mL 完全培养基重悬细胞，按需求调整接种比例，并补充培养瓶中完全培养基，T75 加至 13-15mL，T25 加至 5mL，加 1% 双抗。
08. 盖上瓶盖拧紧后轻轻晃动瓶身，使细胞混合均匀后置于 37℃,5% CO2 培养箱中。
细胞冻存
01. 准备冻存液，并提前预冷。
02. 确保待冻存的细胞满足冻存要求，用显微镜检查以下状态：健康的外观及形态特征、所处生 长周期（对数晚期）、无污染或衰退迹象。
03. 对细胞进行消化及离心处理（具体步骤参考传代培养流程）
04. 按照每管 1mL 的量添加冻存液重悬细胞，吹打均匀后分装至冻存管。
05. 将细胞放在程序降温盒中，在 -80℃冰箱中冷冻。
06. 后续将细胞转移到液氮罐中，以便长期储存。