产品分类
C19T细胞 pole基因（p286r：CCT>CGG）点突变细胞系
- 产品描述
-
- 品牌: ELEMok138cn太阳集团529
- 商品名称: C19T细胞 pole基因（p286r：CCT>CGG）点突变细胞系
- 商品编号: LMPM17218973
- 产品规格: 冻存管1×10^6/管或T25活细胞/瓶
- 销售价格: 询价
细胞系信息
● 细胞名称：C19T（小鼠肺上皮SV40永生化细胞）
● 突变基因：pole
● 突变位点：p286r：CCT>CGG
● 基因型：纯合子
● 物种：小鼠
● NCBI ID：18973
● 细胞形态：贴壁细胞
● 完全培养基成分：1640+5%FBS(Corning)+1%PS
● 传代比例：1:2~1:4
● 传代频次：2~3 天传代一次
● 支原体检测：阴性基因编辑信息
● 构建方法：基因点突变细胞构建是通过核转染法将 gRNA 与 Cas9 蛋白组装而成的 RNP 复合物以及携带目标点突变的单链 Oligo 共转入细胞，然后使用极限稀释法分离单克隆。RNP 复合物对靶位点造成DNA双链断裂后，细胞以Oligo作为模板进行同源重组修复（HDR），将目标点突变重组到基因组靶位点。最后对靶位点进行扩增及测序验证，筛选出突变的阳性克隆。
● 应用场景：ok138cn太阳集团529点突变细胞系，精准模拟单碱基变异，适用于基因功能解析、疾病机制研究。可构建肿瘤、遗传病等病理细胞模型，用于药物靶点验证、耐药性评估，为基础科研与新药研发提供标准化、高可靠的体外实验体系。
● 验证数据：
细胞培养说明
● 细胞复苏
1）从液氮罐或者-80℃冰箱取出细胞冻存管，并迅速将冻存管置于37℃水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，可将冻存管置于干净的一次性PE手套内再置于水浴中。
2）待冻存管中液体融化后，立即取出，并用75%酒精纱布擦拭冻存管表面。
3）将冻存管置于生物安全柜中，并将冻存管中的液体转移到含有约9mL完全培养基的离心管中，300g，5min离心，弃上清。
4） 用适量的完全培养基重悬细胞并转移到新的培养瓶中，并将细胞置于5% CO2、37℃恒温培养箱静置培养。
● 细胞传代
细胞汇合度达到80%以上后可进行细胞传代操作，传代比例 1:2~1:4，2~3 天传代一次。具体操作如下：
1）吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入适量PBS洗涤一次。
2）加入约1.0 mL 0.25%胰酶，轻轻晃动浸润细胞，然后放在培养箱内消化 2~3 分钟，在显微镜下观察发现细胞变圆，轻轻拍打瓶壁观察到80%细胞从壁上脱落分离时即可加入约5ml完全培养基中和胰蛋白酶。并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落使细胞分散成单细胞悬液。（此处为T75培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）
3）将中止消化后的细胞悬液转移至干净的15ml离心管中，300g，5min离心，弃上清。
4）用适量的完全培养基重悬细胞，并按照传代比例（推荐传代比例1：2~1：4）转移到新的培养瓶中，并将细胞置于5% CO2、37℃恒温培养箱静置培养。
● 细胞冻存
细胞汇合度达到80%-90%时可进行细胞冻存操作。自制冻存液成分，为保证冻存细胞较高活力，冻存液最好提前配制并置于4℃冰箱预冷。
细胞冻存具体操作如下：
1）吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入适量PBS洗涤一次。
2）加入约1.0 mL 0.25%胰酶，轻轻晃动浸润细胞，然后放在培养箱内消化 2~3 分钟，在显微镜下观察发现细胞变圆，轻轻拍打瓶壁观察到80%细胞从壁上脱落分离时即可加入约5ml完全培养基中和胰蛋白酶。并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落使细胞分散成单细胞悬液。（此处为T75培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3）将中止消化后的细胞悬液转移至干净的15ml离心管中，300g，5min离心，弃上清。
4）根据细胞沉淀量加入适量提前配制好并预冷的细胞冻存液（推荐1个T75培养瓶的细胞可加入3ml冻存液），轻轻吹打使细胞分散。
5）将4）的细胞悬液转移至细胞冻存管中，1ml/管。冻存管需提前写好标签或者贴好标签。标签信息包含细胞名称，代次，冻存时间及操作人员姓名等。
6）将细胞冻存管置于细胞程序降温盒中，并将盒子置于-80℃冰箱中过夜。过夜后可将冻存管转移至液氮罐中长期保存。
点击下方链接，查看详细资料
产品说明书 | ok138cn太阳集团529Easy point mutation点突变细胞构建定制服务及产品
产品类型： 点突变细胞系
| 阳性对照试剂盒（TRAC_gene） | 定制靶基因敲除试剂盒-基础版 | 定制靶基因敲除试剂盒-加强版 | |
| 试剂组成： | |||
| sgRNA引物 | √ | √ | √ |
| PCR引物 | √ | √ | √ |
| 测序引物 | √ | √ | √ |
| 细胞裂解液 | √ | √ | √ |
| cas9蛋白 | √ | × | √ |
| 转染试剂 | √ | × | √ |
| 产品规格 | 3次反应 | 5-10次反应 | 5-10次反应 |
| 交付周期 | 1-2周 | 1-2周 | 1-2周 |
| 交付标准 | 经验证，敲除效率最高可达100%，平均敲除效率90% | 经验证，敲除效率在70%以上(通过对照试剂盒优化细胞转染条件后保障效率) | 经验证，敲除效率在70%以上(通 过对照试剂盒优化细胞转染条件后 保障效率) |
| 价格 | RMB：899 | RMB：1899 | RMB：2699 |
基因敲除试剂盒信息
Gene Symbol
NCBI Gene ID
Ensembl ID
Uniprot ID
规格
物种
储存条件
试剂组成
基因敲除试剂盒说明
产品优势
应用