产品分类
HEK293T细胞ss-HRP-KDEL过表达多克隆细胞系
- 产品描述
- 参数
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- 自定义tab2
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- 品牌: HUAWEI P50 Pro
- 商品名称: 【搭载HarmonyOS 2】HUAWEI P50 Pro 4G全网通 原色双影像单元 麒麟9000芯片 万象双环设计 8GB+256GB曜金黑手机
- 商品编号: 234567895678
- 上市月份: 官网信息为主
- 商品毛重: 350.00g
- 商品产地: 中国大陆
- 系统: HarmonyOS 2
- 支持IPv6: 支持IPv6
京东价：京东价为商品的销售价，是您最终决定是否购买商品的依据。
京东价：京东价为商品的销售价，是您最终决定是否购买商品的依据。 划线价：商品展示的划横线价格为参考价，并非原价，该价格可能是品牌专柜标价、商品吊牌价或由品牌供应商提供的正品零售价（如厂商指导价、建议零售价等）或其他真实有依据的价格；由于地区、时间的差异性和市场行情波动，品牌专柜标价、商品吊牌价等可能会与您购物时展示的不一致，该价格仅供您参考。折扣：如无特殊说明，折扣指销售商在原价、或划线价（如品牌专柜标价、商品吊牌价、厂商指导价、厂商建议零售价）等某一价格基础上计算出的优惠比例或优惠金额；如有疑问，您可在购买前联系销售商进行咨询。 异常问题：商品促销信息以商品详情页“促销”栏中的信息为准；商品的具体售价以订单结算页价格为准；如您发现活动商品售价或促销信息有异常，建议购买前先联系销售商咨询关键词:- 关键词1
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主体
- 上市月份 以官网信息为准
- 上市年份 2021年
- 首销日期 以官网信息为准
- 入网型号 JAD-AL50
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基本信息
- 机身宽度（mm） 72.8
- 机身厚度（mm） 8.5
- 机身材质分类 玻璃后盖；金属边框
- 机身长度（mm） 158.8
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数据接口
- 数据传输接口 WiFi热点；WIFI；NFC；蓝牙；WiFi Direct；OTG接口；红外
- NFC/NFC模式 支持卡模拟；支持（卡模式）；支持（读卡器模式）；支持（点对点模式）
- 充电接口类型 Type-C
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- 本商品质保周期为1年质保，在此时间范围内可提交维修申请，具体请以厂家准。 如因质量问题或故障，凭厂商维修中心或特约维修点的质量检测证明，享受7日内退货1日内换货，15日以上在质保期内享受免费保修等三包服务！(注:如厂家在商品介绍中有售后保障的说明
- 本商品质保周期为1年质保，在此时间范围内可提交维修申请，具体请以厂家准。 如因质量问题或故障，凭厂商维修中心或特约维修点的质量检测证明，享受7日内退货1日内换货，15日以上在质保期内享受免费保修等三包服务！(注:如厂家在商品介绍中有售后保障的说明,则此商品按照厂家说明执行售后保障服务。) 您可以查询本品牌在各地售后服务中心的联系方式，请点击这儿查询...... 品牌官方http://www.huawei.com/cn/售后服务电话：950800
产品类型： 过表达细胞系
产品详情介绍
细胞系信息
● 细胞名称：HEK293T
● 基因名称：ss-HRP-KDEL
● 细胞类型：多克隆
● 物种：人
● 细胞形态：贴壁细胞，成纤维细胞样
● 完全培养基成分：DMEM+10%FBS+1%PS
● 传代比例：1：2~1：4
● 传代频次：2~3 天传代一次
● 支原体检测：阴性
基因编辑信息
● 构建方法
PB转座子系统：采用自主优化的随机多拷贝转座子基因敲入( knock in)Shotgun©平台将ss-HRP-KDEL多拷贝插入到细胞基因组转录活性位点，然后通过抗性筛选得到稳定细胞池，再通过有限稀释法培养得到稳定的整合较高拷贝数目的基因的过表达单克隆细胞系。
● 应用场景
ok138cn太阳集团529过表达细胞系，实现靶基因稳定高丰度表达，助力基因功能获得性研究与信号通路解析。适配疾病模型构建、靶点验证、抗体及小分子药物筛选，为基础科研与创新药研发提供高效稳定的体外实验模型。
● 验证数据
1.1.ss-HRP-KDEL过表达序列
2.2.ss-HA-HRP-Myc-KDEL基因过表达检测
细胞培养说明
● 细胞复苏
1）从液氮罐或者-80℃冰箱取出细胞冻存管，并迅速将冻存管置于37℃水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，可将冻存管置于干净的一次性PE手套内再置于水浴中。
2）待冻存管中液体融化后，立即取出，并用75%酒精纱布擦拭冻存管表面。
3）将冻存管置于生物安全柜中，并将冻存管中的液体转移到含有约9mL完全培养基的离心管中，300g，5min离心，弃上清。
4） 用适量的完全培养基重悬细胞并转移到新的培养瓶中，并将细胞置于5% CO2、37℃恒温培养箱静置培养。
● 细胞转染
1）细胞准备：参考细胞传代流程进行细胞消化。并进行细胞计数，根据计数 结果，取相应细胞备用，接种密度为 1.0×106 cells/ml，体积为 2 ml/孔，铺六孔板，37℃、5%CO2 静置培养 24h。
2）配置转染复合物（以一孔为例）：
a 离心管 1 中加入 100 μl 的 opti-MEM 培养液、2 μg DNA；
b 离心管 2 中加入 100 μl 的 opti-MEM培养液、转染试剂；
c 将离心管 2 加入离心管 1 中，混匀，静置 10 min；
3）转染：将上述复合物加入 6 孔板中，置于 37℃，5% CO2浓度的静置培养箱内培养72h。
4）细胞加压筛选：通过puromycin 的作用筛选稳定整合细胞株。
● 细胞传代
当细胞密度达到 80%以上时，可以进行传代，传代比例 1：2~1：4，2~3 天传代一次。具体操作如下：
1）吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入适量PBS，轻轻晃动润洗细胞，然后将PBS 吸出。
2）加入约1.0 mL 0.25%胰酶，轻轻晃动浸润细胞，然后放在培养箱内消化 2~3 分钟，在显微镜下观察发现细胞变圆，轻轻拍打瓶壁观察到80%细胞从壁上脱落分离时即可加入约5ml完全培养基中和胰蛋白酶。并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落使细胞分散成单细胞悬液。（此处为T75培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3）将终止消化后的细胞悬液转移至干净的15ml离心管中，300g，5min离心，弃上清。
4）用适量的完全培养基重悬细胞，并按照传代比例（推荐传代比例1：2~1：4）转移到新的培养瓶中，并将细胞置于5% CO2、37℃恒温培养箱静置培养。
● 细胞冻存
细胞汇合度达到80%-90%时可进行细胞冻存操作。为保证冻存细胞较高活力，冻存液最好提前配制并置于4℃冰箱预冷。
细胞冻存具体操作如下：
1）吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入适量PBS洗涤一次。
2） 加入约1.0 mL 0.25%胰酶，轻轻晃动浸润细胞，然后放在培养箱内消化 2~3 分钟，在显微镜下观察发现细胞变圆，轻轻拍打瓶壁观察到80%细胞从壁上脱落分离时即可加入约5ml完全培养基中和胰蛋白酶。并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落使细胞分散成单细胞悬液。（此处为T75培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3）将终止消化后的细胞悬液转移至干净的15ml离心管中，300g，5min离心，弃上清。
4）根据细胞沉淀量加入适量提前配制好并预冷的细胞冻存液（推荐1个T75培养瓶的细胞可加入3ml冻存液），轻轻吹打使细胞分散。
5）将细胞悬液转移至细胞冻存管中，1ml/管。冻存管需提前写好标签或者贴好标签。标签信息包含细胞名称，代次，冻存时间及操作人员姓名等。
6）将细胞冻存管置于细胞程序降温盒中，并将盒子置于-80℃冰箱中过夜。过夜后可将冻存管转移至液氮罐中长期保存。
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